ПЦР анализ — преимущества, расшифровка и описание метода

Впервые об анализе методом ПЦР заговорили в 1983 году. Данная методика была разработана Кэри Мюллисом и сотрудниками его лаборатории. С тех пор популярность исследования неуклонно возрастает, т.к. оно обладает существенным рядом преимуществ перед другими методиками.

На сегодняшний день ПЦР диагностика является эталоном или стандартом в выявлении инфекций и возбудителей заболеваний, особенно протекающих бессимптомно. В первую очередь это доклиническая диагностика.

ПЦР анализ, что это такое?

Проведение анализа в ПЦР машине

Сущность ПЦР анализа заключается в том, что в пробирке клонируются (многократно увеличиваются) последовательности нуклеиновых кислот (ДНК или РНК), характерных для определенного вида возбудителей.

Аббревиатура ПЦР расшифровывается как — полимеразно цепная реакция.

Главная отличительная черта данного метода – это амплификация, т.е. создание огромного числа копий необходимого гена или его фрагмента. Все это производится вне организма, т.е. в пробирке.

Так, если проведено 20 циклов ПЦР, то получается примерно 1 миллион копий и более. Это позволяет обнаружить инфекцию даже при её незначительном количестве в исходном материале, когда другие методы анализа бессильны. Это определяет высокую чувствительность данного метода.

Простыми словами можно провести такую аналогию — одну маленькую песчинку на полу вы не заметите, но после увеличения количества песчинок в миллион раз (проведение ПЦР), кучка песка уже будет хорошо видна.

Мнение врача:

ПЦР-анализ является одним из самых точных методов диагностики инфекционных заболеваний. Врачи отмечают, что основным преимуществом этого метода является его высокая чувствительность и специфичность. Это позволяет выявлять возбудителей инфекций на ранних стадиях, что в свою очередь способствует более эффективному лечению. Расшифровка результатов ПЦР-анализа позволяет определить конкретный вид патогена и его количество в организме пациента. Благодаря этой информации врачи могут подобрать наиболее эффективное лечение для каждого конкретного случая.

ПЦР – диагностика вирусной инфекции, коронавируса – наглядное объяснение метода

Преимущества ПЦР-диагностики

Основными преимуществами анализа на инфекции ПЦР-методом являются:

• наиболее высокая чувствительность
  и специфичность в сравнении с другими методами, используемыми для выявления инфекционных агентов;
• возможность выявления микроорганизмов в разнообразных биологических материалах (кровь, моча, влагалищный секрет, слюна и т.д.);
• возможность выявить одновременно несколько причинных микроорганизмов, если таковое наблюдается. Для сравнения — использование бактериологических методов не дает такой возможности, т.к. необходимо применение различных сред для выращивания различных болезнетворных микробов;
• возможность транспортировки биологического материала, т.к. для выявления возбудителя не обязательно сохранять его в живом виде;
• скоростьвыполнения анализа;
• точность проводимой этиологической диагностики;
• возможность количественного определения возбудителей — особенно актуально для условно-патогенных микробов, которые только по достижении определенной концентрации способны вызывать заболевание;
• способность контролировать течение инфекционного процесса при проведении лечения.

Интересные факты

1. ПЦР-анализ (полимеразная цепная реакция) был изобретен в 1983 году американским биохимиком Кэри Муллисом. За это открытие он получил Нобелевскую премию по химии в 1993 году.
2. ПЦР-анализ позволяет многократно копировать определенный участок ДНК, что делает его очень чувствительным методом диагностики. Благодаря этому ПЦР-анализ может обнаружить даже очень небольшое количество возбудителя инфекции в образце.
3. ПЦР-анализ используется для диагностики широкого спектра инфекционных заболеваний, включая вирусные, бактериальные, грибковые и паразитарные инфекции. Он также используется для диагностики генетических заболеваний и для определения отцовства.

Что такое ПЦР?

Анализ ПЦР на инфекции

В настоящее время методом полимерзной цепной реакции определяют большинство половых (и других) инфекционных заболеваний. Диагностика получила широкое распространение за счет своей высокой чувствительности и специфичности.

Особенно большой популярностью пользуется анализ ПЦР на хламидии.

Это связано с тем, что данные микроорганизмы обитают внутриклеточно, что создает определенные трудности в их обнаружении.

ПЦР-диагностика позволяет выявлять даже минимальное количество хламидий, которые, как правило, еще не приводят к появлению клинических симптомов. Даже наличие только 2 молекул нуклеиновых кислот в исследуемом материале позволяет выявить причинную инфекцию.

А это залог успешного лечения, которое начинается еще на доклиническом этапе.

Также производится определение инфекций:

• ВИЧ;
• вирусные гепатиты;
• туберкулез;
• клещевой энцефалит;
• различные венерические заболевания и т.д.

ПЦР-диагностика позволяет решать и ряд других важных задач:

• мониторинг терапии и оценка ее эффективности;
• определение «нагрузки вирусами», на основании которой производится индивидуальный подбор дозы препарата;
• выявление штаммов микроорганизмов, отличающихся фармакологической устойчивостью (нечувствительностью к лекарственным препаратам).

Опыт других людей

ПЦР-анализ – это надежный метод определения наличия инфекций и генетических отклонений. Люди отмечают его высокую точность и скорость получения результатов. Этот метод позволяет обнаружить вирусы, бактерии и генетические мутации, что делает его важным инструментом в медицине и научных исследованиях. Расшифровка результатов проводится специалистами, их интерпретация помогает определить состояние здоровья и принять необходимые меры.

ПЦР анализ – что это такое

Подготовка к сдаче анализа

Целенаправленно готовиться к сдаче анализа, который будет проводиться методом ПЦР, не требуется. Однако очень важно, чтобы специалист производил забор материала с соблюдением всех необходимых условий стерильности.

Так, например, для взятия крови следует применять специальные вакуумные системы, для взятия секрета половых органов следует использовать специальные пробирки и т.д.

В некоторых случаях в лабораторию материал следует транспортировать. Чтобы это сделать правильно, необходимо герметично закрыть емкость с биологическим материалом. Это позволит предупредить проникновение туда иных микроорганизмов, обитающих во внешней среде.

Расшифровка результата ПЦР

Результаты ПЦР-анализа могут быть двух вариантов:

• положительный – возбудитель обнаружен;
• отрицательный – возбудитель не выявлен.

Следует знать — даже при отсутствии клинической симптоматики может быть получен положительный результат.

В данном случае ориентироваться необходимо на данные полимеразной реакции, т.к. она позволяет выявить заболевание на доклинической стадии.

Иногда может быть получен сомнительный ответ, когда количество выявленных копий соответствует верхней границе нормы. Чтобы уточнить причину заболевания, следует повторить анализ, уделив особое внимание условиям сбора биологического материала.

Насколько точна ПЦР-диагностика?

Основные преимущества ПЦР-диагностики можно сформулировать в виде нескольких тезисов:

• возможность получения огромного числа копий патогенных микроорганизмов;
• большое количество копий – это залог успешного секвенирования (выявления).

Это обеспечивает высокую точность ПЦР-анализа для обнаружения внутриклеточных возбудителей и медленно растущих микроорганизмов.

Поэтому метод особенно информативен для выявления туберкулезных микобактерий и других подобных инфекционных агентов. Он обладает высочайшей точностью и не нуждается в перепроверке полученных результатов (кроме казуистических случаев).

Для получения наиболее достоверных результатов необходимо выполнение двух основных условий, которые предупреждают экзогенное (внешнее) инфицирование:

• правильный забор материала;
• правильная транспортировка.

Частые вопросы

Как расшифровать анализ ПЦР?

Полимеразная цепная реакция (ПЦР) — экспериментальный метод молекулярной биологии, способ значительного увеличения малых концентраций определённых фрагментов нуклеиновой кислоты (ДНК) в биологическом материале (пробе).

На чем основан принцип метода ПЦР?

В основе метода ПЦР лежит многократное удвоение определённого участка ДНК при помощи ферментов в искусственных условиях (in vitro). В результате нарабатываются количества ДНК, достаточные для визуальной детекции.

Для чего используется ПЦР?

КриминалистикаУстановление отцовстваМедицинская диагностика (ПЦР-тест)Персонализированная медицинаКлонирование геновСеквенирование ДНКМутагенезМолекулярное сексирование

Как работает ПЦР?

Как работает ПЦР В ходе исследования пробирку с биоматериалом помещают в особые условия, под воздействием которых молекулы нуклеиновой кислоты (двухнитевая ДНК, присутствующая в пробе или синтезированная из однонитевой РНК), кодирующие генетическую информацию определённого патогена, многократно копируются.

Полезные советы

СОВЕТ №1

При подготовке к ПЦР анализу убедитесь, что образец для исследования собран и хранится правильно, чтобы избежать возможного загрязнения или разрушения ДНК или РНК.

СОВЕТ №2

После получения результатов ПЦР анализа обратитесь к специалисту для правильной интерпретации и понимания полученной информации, так как некорректная расшифровка может привести к неправильным выводам.